Karbapenēma rezistences gēns (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Produkta nosaukums
HWTS-OT045 karbapenēma rezistences gēna (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) noteikšanas komplekts (fluorescences PCR)
Epidemioloģija
Karbapenēmu grupas antibiotikas ir netipiskas β-laktāma antibiotikas ar visplašāko antibakteriālo spektru un spēcīgāko antibakteriālo aktivitāti. Pateicoties stabilitātei pret β-laktamāzi un zemajai toksicitātei, tā ir kļuvusi par vienu no svarīgākajām antibakteriālajām zālēm smagu bakteriālu infekciju ārstēšanā. Karbapenēmi ir ļoti stabili pret plazmīdu mediētām paplašināta spektra β-laktamāzēm (ESBL), hromosomām un plazmīdu mediētām cefalosporināzēm (AmpC enzīmiem).
Kanāls
| PCR maisījums 1 | PCR maisījums 2 | |
| Ģimenes locekļu skaits | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Iekšējā kontrole | Iekšējā kontrole |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Tehniskie parametri
| Uzglabāšana | ≤-18 ℃ |
| Derīguma termiņš | 12 mēneši |
| Parauga tips | Krēpas, tīras kolonijas, taisnās zarnas uztriepe |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103KVV/ml |
| Specifiskums | a) Komplekts nosaka standartizētās uzņēmuma negatīvās atsauces, un rezultāti atbilst atbilstošo atsauces vielu prasībām. b) Krustotās reaktivitātes testa rezultāti liecina, ka šim komplektam nav krusteniskas reakcijas ar citiem elpceļu patogēniem, piemēram, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respiratoro adenovīrusu, Enterococcus vai paraugiem, kas satur citus pret zālēm rezistentus gēnus CTX, mecA, SME, SHV, TEM utt. c) Prettraucējumi: Traucēšanās testam tiek izvēlēti mucīns, minociklīns, gentamicīns, klindamicīns, imipenēms, cefoperazons, meropenēms, ciprofloksacīna hidrohlorīds, levofloksacīns, klavulānskābe, roksitromicīns, un rezultāti liecina, ka iepriekšminētajām traucējošajām vielām nav traucējošas reakcijas uz karbapenēma rezistences gēnu KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM un IMP noteikšanu. |
| Piemērojamie instrumenti | Applied Biosystems 7500 reāllaika PCR sistēmas QuantStudio®5 reāllaika PCR sistēmas SLAN-96P reāllaika PCR sistēmas (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 reāllaika PCR sistēma LineGene 9600 Plus reāllaika PCR noteikšanas sistēma (FQD-96A，HandžouBioenerģijas tehnoloģija) MA-6000 reāllaika kvantitatīvais termiskais ciklers (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 reāllaika PCR sistēma BioRad CFX Opus 96 reāllaika PCR sistēma |
Darba plūsma
1. variants.
Ieteicamais ekstrakcijas reaģents: Macro & Micro-Test General DNS/RNS komplekts (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (ko var izmantot ar Macro & Micro-Test automātisko nukleīnskābju ekstraktoru (HWTS-3006C, HWTS-3006B)), ko ražo Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Pievienojiet tallusa nogulsnēm 200 μL fizioloģiskā šķīduma. Turpmākajās darbībās jāievēro ekstrakcijas instrukcijas, un ieteicamais eluēšanas tilpums ir100 μL.
2. variants.
Ieteicamais ekstrakcijas reaģents: nukleīnskābju ekstrakcijas vai attīrīšanas reaģents (YDP302), ko ražo Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstrakcija jāsāk, stingri ievērojot lietošanas instrukcijas 2. darbību (tallusa nogulsnēm pievienot 200 μL GA buferšķīduma un kratīt, līdz talluss ir pilnībā suspendēts). Eluēšanai izmantot ūdeni bez RNāzes/DNāzes, un ieteicamais eluēšanas tilpums ir 100 μL.
3. variants.
Ieteicamais ekstrakcijas reaģents: makro un mikro testa parauga atbrīvošanas reaģents. Krēpu paraugs ir jāmazgā, pievienojot 1 ml fizioloģiskā šķīduma iepriekšminētajām apstrādātajām tallusa nogulsnēm, centrifugējot ar ātrumu 13000 apgr./min 5 minūtes un supernatantu izmetot (saglabājot 10–20 µl supernatanta). Tīras kolonijas un rektālās uztriepes iegūšanai iepriekšminētajām apstrādātajām tallusa nogulsnēm pievienojiet 50 μL parauga atbrīvošanas reaģenta, un turpmākās ekstrakcijas darbības jāveic saskaņā ar lietošanas instrukciju.
